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农药登记环境影响试验试材使用现状及管理建议(2)
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摘要：10 美国EPA制定的环境归趋试验报告评审指南[7]中规定：土壤代谢试验应使用4种能代表农药使用区域的土壤，有机碳含量、pH、粘粒含量和微生物量应有一定
<4.0～6.0<0.5～1.5<10～15壤质砂土5<4.5>10<10砂土/壤质砂土
美国EPA制定的环境归趋试验报告评审指南[7]中规定：土壤代谢试验应使用4种能代表农药使用区域的土壤，有机碳含量、pH、粘粒含量和微生物量应有一定差异。土壤吸附试验至少使用5种农药使用区域的代表性土壤或沉积物。其中一种土壤的有机质含量低于1%。
我国现行《农药登记资料要求》[2]中，土壤好氧代谢、厌氧代谢、表面光解、吸附、淋溶试验，以及农药在土壤中的分析方法与验证等6项环境归趋测试以及土壤微生物毒性测试需要使用土壤试材。根据GB/T [1]，土壤降解试验、表面光解试验、吸附试验、淋溶试验和微生物毒性试验等5个试验均要求使用天然土壤，推荐使用红壤土、水稻土、黑土、潮土、褐土等5类土壤。具体土壤类型及其理化性质要求(表3)。
表3 我国农药登记环境归趋试验准则对土壤的要求[1]序号土类pH有机质含量(%)1红壤土4.5～5.50.8～1.52水稻土5.5～7.01.5～2.03黑土6.5～7.52.0～3.04潮土7.5～8.51.0～2.05褐土6.5～8.50.8～1.5
总体而言，有机碳含量、pH、粘粒含量和微生物量等4个土壤参数是影响试验测定结果的重要因素，但由于微生物量的控制较难，国外的试验准则主要基于前3个因素进行规定，并要求试验选择的不同类型的土壤应体现这3个因素的差异。归纳起来，OECD准则中上述因素的取值范围为：pH，(<4.0)～(>7.5)；有机质含量，(<0.5%)～(>10%)；粘粒含量，(<10%)～ 80%。
2 我国农药登记环境影响试验试材使用现状
2.1 生物试材 我国农药登记环境影响试验中常用的生物试材有11类25种[2]。对25家实验室的问卷调查结果表明，除鸟类(日本鹌鹑)、蜜蜂(意大利蜜蜂)、溞类(大型溞)、穗状狐尾藻、蚯蚓(赤子爱胜蚓)、捕食性天敌(七星瓢虫)采用统一物种外，其他生物类别各实验室采用的物种均有所不同。其中，鱼类主要采用斑马鱼，占90%以上，其他测试物种包括鲤鱼、虹鳟鱼、稀有鮈鲫、日本青鳉等；淡水绿藻主要采用羊角月牙藻，其次为斜生栅列藻，少数使用普通小球藻；浮萍主要采用紫背浮萍(占64%)，其次是小浮萍，个别采用圆瘤浮萍；家蚕以菁松×皓月蚕种为主(占67%)，部分实验室采用了春蕾×镇珠、苏菊×明虎等其他具有代表性的蚕种；寄生性天敌主要采用玉米螟赤眼蜂(占74%)，少数采用松毛虫赤眼蜂、拟澳洲赤眼蜂、舟螟赤眼蜂、螟黄赤眼蜂等。
各实验室试材来源渠道差异也较大，导致生物试材的生物学背景信息相差较大。大型溞、绿藻、浮萍、穗状狐尾藻、蜜蜂、蚯蚓、瓢虫、赤眼蜂及少数实验室的斑马鱼等主要是通过外部引种后在实验室内自行扩繁；鸟类、鱼类、家蚕等繁殖周期相对较长的试材通常为直接购买，验收合格后用于试验。具备资质的专业的试材提供机构通常能够为实验室出具试材品系证书，并提供详细的培养过程，例如，中国科学院典型培养物保藏委员会淡水藻类库。科研单位或大型养殖机构所提供的试材品种信息较为可靠，但无法提供品系证书，这是目前大多数外购试材的供应渠道，例如，从中国农科院植保所购买赤眼蜂和瓢虫卵卡等。而从市场或者网络购买的试材则生物学信息可靠性较差，例如，部分单位从市场上购买观赏斑马鱼用于试验、从天猫商城购买七星瓢虫卵卡用于试验。还有部分实验室直接从野外采集试材，例如穗状狐尾藻、瓢虫、浮萍等，经纯化后在实验室内进行扩繁和试验。此外，还存在实验室之间相互提供试材的情况，例如大型溞、绿藻、瓢虫等。
生物试材的价格也在一定程度上反映了试材的质量，标准的生物试材价格远远高于市场上普通流通的试材，但不同地区、不同供货机构的价格客观上也存在差异。
2.2 土壤试材 GB/T [1]规定的红壤、水稻土、黑土、潮土、褐土均属于《中国土种志》[8]中耕型面积排前十的土类目前，国内环境归趋实验室所采用的土壤试材基本都是实验室间相互提供或委托其他单位采集，并委托专业机构或自行进行理化参数测定。
3 试材规范化管理中存在的问题
3.1 生物试材 首先，大多数生物试材遗传背景不清楚。从调查情况来看，各实验室的生物试材来源渠道多样化，仅少数生物试材有相关证书。这可能导致试验数据的可比性和可重复性较差。例如，部分市场上的斑马鱼品种可能是为了增强观赏价值而改造的杂交品种。
其次，一部分生态毒理学试验尚未建立参比物测试方法。目前国内现行生态毒性试验准则中仅有9个试验推荐了参比物及其毒性终点范围。其余试验尚未建立参比物试验方法，或推荐了参比物但缺少可参考的毒性终点范围，从而无法对生物试材的质量进行检验。
文章来源：《生态毒理学报》 网址: http://www.stdlxbzz.cn/qikandaodu/2021/0710/1571.html