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复方的功能及毒理学研究(2)

作者:

关键词:

摘要：

1.4.3 毒理学试验

1.4.3.1 小鼠急性毒性试验

采用最大耐受剂量法试验，选用体重为25～32 g的小鼠20只，雌雄各半。小鼠灌胃前16 h禁食，自由饮水，于第2 d 以 15.0 g/kg灌胃后，连续观察14 d，记录动物中毒症状及死亡情况。

1.4.3.2 遗传毒性试验

（1）污染物致突变性检测（Ames试验）：采用鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四种标准突变型试验菌株。大鼠肝匀浆S-9采用多氯联苯诱导Wistar大鼠，按Ames常规方法自行制备。剂量组分设5 000μg/皿、1 000μg/皿、200μg/皿、40μg/皿和8 μg/皿5个剂量组，设自发回变、溶剂对照和阳性对照组，每种菌株每个测试浓度设3个平皿，在加和不加S-9条件下进行试验。37 ℃培养 48 h，记录回复突变菌落数。

（2）小鼠骨髓嗜多染红细胞（PCE）微核试验：50只小鼠（雌雄各半，体重25～32 g）随机分成5组，设 2.5 g/kg.bw、5.0 g/kg.bw 和 10.0 g/kg.bw 三个不同剂量组，1个环磷酰胺阳性对照组（40 mg/kg.bw）和1个纯化水阴性对照组。小鼠按0.02 mL/kg体重灌胃容量，间隔24 h灌胃2次，于末次灌胃后6 h处死动物，制取胸骨髓液，涂片，甲醇固定，染色。镜检PCE，每鼠计数1 000个嗜多染红细胞，计算微核千分率，以%表示；同时计数PCE和正染红细胞的比值（PCE/NCE）。

（3）小鼠精子畸形试验：50只雄性小鼠（体重25～32 g）随机分成 5 组，每组 10 只。设 2.5 g/kg.bw、5.0 g/kg.bw和10.0 g/kg.bw三个不同剂量组，另设植物油阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组，受试物按0.02 mL/g体重灌胃容量以灌胃方式给予，连续5 d，继之饲养1月，自由摄食、饮水，于35 d颈椎脱臼处死，常规制片，记录畸形精子数，计算精子畸形率。

1.5 试验数据统计

对试验数据进行方差齐性检验，对方差齐者采用t检验；如数据方差不齐，则采用非参数检验。应用软件为 SPSSI 1.5 及 SPSSI 6.0 for Windows。

2 结果与分析

2.1 改善记忆力动物试验

2.1.1 跳台试验结果

由表1可知，跳台试验中，经口给予小鼠不同受试物剂量的受试物30 d，记忆获得（训练）过程中，与正常对照组相比，受试物中、高剂量组的平均错误次数均显著减少（P＜0.05）；重复测验过程中，与正常对照组相比，受试物高剂量组跳下平台的潜伏期延长，平均错误次数减少，错误反应率显著降低（P＜0.05）。

2.1.2 水迷宫试验结果

由表2可知，水迷宫试验中，给予小鼠不同剂量的受试物30 d，与正常对照组比较，各受试物剂量组动物到达终点所需的时间显著缩短（P＜0.05）；平均错误次数显著减少（P＜0.05）；到达终点的动物数显著多（P＜0.05）。

2.2 免疫试验

2.2.1 对小鼠体重和脏器体重比值的影响

正常对照组和3个剂量组共4个组初始体重的方差分析结果显示，在各组间小鼠的初始体重较为均衡，各组均数间差异均无显著性（P＞0.05）。给予小鼠不同剂量的受试物制剂30 d，正常对照组和3个剂量组共4个组体重增长值的方差分析结果显示，各组均数间差异无显著性（P＞0.05），即该受试物对小鼠体重无影响；脾脏体重比值和胸腺体重比值的方差分析结果显示，各组均数间差异无显著性（P＞0.05），即受试物对小鼠脾脏体重比值和胸腺体重比值均无影响。

2.2.2 受试物对小鼠细胞免疫功能的影响

由表3正常对照组和3个剂量组共4个组的小鼠足跖肿胀度的方差分析结果显示，与正常对照组相比，中、高剂量受试物组间有显著性差异（P＜0.05），由此可知该受试物有提高小鼠迟发型变态反应的能力；淋巴细胞增殖能力的方差分析结果显示，各组均数间无显著性差异（P＞0.05），表明该受试物细胞免疫试验结果为阳性。

表1 跳台试验结果注：*表示在P＜0.05水平与正常对照组相比具有统计学意义组别剂量/（g/kg.bw）动物/只潜伏期/s 错误次数错误反应率/%训练测试训练测试正常对照组 0.00 10 99. 2. 0. 100 65低剂量组 0.17 10 143. 1. 0. 100 49中剂量组 0.33 10 121. 1.* 0. 90 38高剂量组 0.66 10 166.* 1.* 0.* 100 12*

表2 水迷宫试验结果注：*表示在P＜0.05水平与正常对照组相比具有统计学意义组别剂量/（g/kg.bw）动物/只到达终点时间/s 错误次数/次 2 min内到终点动物数量/只百分率/%正常对照组 0.00 10 415. 42. 29 58低剂量组 0.17 10 326.* 30.* 40* 80*中剂量组 0.33 10 302.* 28.* 40* 80*高剂量组 0.66 10 318.* 28.* 41* 83*

文章来源：《生态毒理学报》网址: http://www.stdlxbzz.cn/qikandaodu/2021/0309/669.html